普通野生稻的籼粳分化研究方法有哪些？

二是日本学者(1982)首先提出普通野生稻在驯化成栽培稻之前已经发生了籼粳分化，并根据同工酶分析认为中国普通野生稻偏粳，南亚普通野生稻偏籼。Sano等人(1989)通过rDNA(核糖核酸)的研究也认为我国东乡普通野生稻也是粳稻。为了深入研究我国是否存在籼粳分化，王翔坤等人(1994)选取了来自我国7个省的571份普通野生稻，根据10形态性状进行聚类分析，区分野生稻和粳稻，并区分出酯酶(Est)和酸性磷酸酶4种同工酶。首先通过Est-x同工酶分析，将供试野生稻材料鉴定为杂合、栽培和纯合，然后对92份纯合普通野生稻的4个同工酶基因位点进行分析。结果表明，92个纯合普通野生稻品种在4个同工酶位点上形成17型(表2-24)。

表2-24中国92份纯合普通野生稻按4个同工酶位点组合的类型

表2-24中国92份纯合普通野生稻按4个同工酶位点组合的类型(续)-1

从表2-24可以看出，我国普通野生稻的同工酶存在籼粳分化，且以粳型为主，且主要集中在14型，具体表现为Cat-1、Amp-2、Est-20和Acp-20，即除Amp-2外，其余3个基因座均为籼型。对27份中国普通野生稻基因组的随机扩增多态性DNA(RAPD)分析也表明，中国普通野生稻以粳稻为主，但同工酶分析和RAPD分析均表明，中国普通野生稻中也存在籼稻类型。

王翔坤等人通过对同工酶和DNA的大量研究表明，除少数原始普通野生稻外，大部分普通野生稻都有籼粳分化，核DNA、线粒体DNA、叶绿体DNA和DNA重复序列中的籼粳分化是一致的，但大部分是不一致的。我国普通野生稻的核DNA多为粳型，部分为籼型。普通野生稻的mtDNA多为籼稻，少数为粳稻；普通野生稻的籼粳cpDNA比值大致为1∶1(王翔坤，1996)。

蔡宏伟等(1993)选择了来自中国7个省(区)的132份普通野生稻材料和来自27个国外的159份普通野生稻材料，通过幼苗叶片中的Est、Acp、Cat和Amp 4个同工酶位点研究了普通野生稻的籼粳分化。结果表明，中国普通野生稻存在籼粳分化。92份中国普通野生稻纯合材料呈从籼型向粳型连续分布，属于偏粳型、偏籼型和籼粳中间型的材料分别占总数的47.82%、14.13%和25.00%。三种类型占86.95%。9.78%和3.26%明显分化为粳型和籼型。从普通野生稻籼粳分化的区域分布来看，纬度较高的江西东乡、江永和湖南茶陵的普通野生稻以粳型为主，而广西的普通野生稻材料存在明显的籼粳分化。与国外相比，国外常见的野生稻大部分是偏籼稻和偏籼稻，而我国常见的野生稻是偏粳稻，但也有部分是偏籼稻。

云南元江的普通野生稻属于一种相对纯合、原始的多年生野生稻。其栖息地位于海拔780m的山坡上，远离栽培稻，其袋装自交后代不分离。袁平荣等(1995)分析测定了45份材料的酯酶和过氧化氢酶同工酶。酯酶显示沅江蒲叶为籼型，但无粳型特征带，过氧化氢酶显示粳型。这种不一致表明元江蒲野也存在籼粳分化的可能性。研究其内部分化对追溯中国栽培稻的起源和演化具有重要意义。